Evaluación de la fiabilidad de los niveles de HbA1c en muestras de sangre en EDTA y en manchas de sangre seca (DBS) para el control de la diabetes mellitus tipo 2. Protocolo de investigación comparativa

AUTORES

1. Natividad Rico Ríos. Facultativo Especialista en Análisis Clínicos. Hospital Universitario Puerta del Mar, Cádiz, España.
2. Santiago García Pinteño. Facultativo Especialista en Bioquímica Clínica. Hospital La Janda, Cádiz, España.
3. Antonio José Reche Martínez. Facultativo Especialista en Bioquímica Clínica. Hospital Puerto Real, Cádiz, España.

RESUMEN

La diabetes mellitus tipo 2 es una de las enfermedades crónicas más prevalentes a nivel global, cuya adecuada gestión depende en gran medida del control preciso de la glucemia a largo plazo. La medición de hemoglobina glicosilada (HbA1c) es una herramienta clave en la monitorización de esta enfermedad, ya que refleja los niveles promedio de glucosa en sangre durante los últimos 2-3 meses. Tradicionalmente, las muestras de sangre recolectadas en tubos con EDTA han sido el estándar para medir HbA1c. Sin embargo, en los últimos años, el uso de tarjetas de manchas de sangre seca (DBS) ha ganado protagonismo debido a su conveniencia, especialmente en entornos donde el acceso a laboratorios es limitado. Este protocolo de investigación tiene como objetivo comparar la precisión de los niveles de HbA1c entre muestras recolectadas en EDTA y DBS en pacientes con diabetes tipo 2, analizando su viabilidad como alternativa en el manejo clínico de la enfermedad. Los resultados podrían tener implicaciones importantes para optimizar el control de la diabetes en contextos con recursos restringidos.

PALABRAS CLAVE

Diabetes mellitus tipo 2, HbA1c, manchas de sangre seca, EDTA, control glucémico, cromatografía líquida, investigación clínica.

ABSTRACT

Type 2 diabetes mellitus is one of the most prevalent chronic diseases worldwide, and its proper management largely depends on the accurate long-term monitoring of blood glucose levels. Glycated haemoglobin (HbA1c) measurement is a key tool in monitoring this disease, as it reflects average blood glucose levels over the past 2-3 months. Traditionally, blood samples collected in EDTA tubes have been the standard for HbA1c measurement. However, in recent years, the use of dried blood spot (DBS) cards has gained prominence due to their convenience, especially in settings where laboratory access is limited. This research protocol aims to compare the accuracy of HbA1c levels between EDTA and DBS samples in patients with type 2 diabetes, evaluating the feasibility of DBS as an alternative in the clinical management of the disease. The results could have significant implications for optimizing diabetes control in resource-constrained settings.

KEY WORDS

Type 2 diabetes mellitus, HbA1c, dried blood spots, EDTA, glycaemic control, liquid chromatography, clinical research.

INTRODUCCIÓN

La diabetes mellitus tipo 2 (DM2) representa un reto significativo para los sistemas de salud debido a su alta prevalencia y la necesidad de una monitorización continua de los niveles de glucosa en sangre.

Uno de los métodos más aceptados para evaluar el control glucémico a largo plazo es la medición de la hemoglobina glicosilada (HbA1c), la cual proporciona una visión retrospectiva del control metabólico durante los 2-3 meses previos a la medición¹. Esta medición se realiza tradicionalmente con muestras de sangre recolectadas en tubos con EDTA, que ofrecen alta fiabilidad, pero requieren un acceso oportuno a laboratorios para su procesamiento.

Sin embargo, en situaciones donde la infraestructura sanitaria es limitada, el uso de manchas de sangre seca (DBS, por sus siglas en inglés) ha emergido como una alternativa atractiva, debido a su facilidad de recolección, transporte y almacenamiento a largo plazo sin necesidad de refrigeración². Dada la simplicidad de su aplicación, el uso de DBS podría mejorar el acceso al control glucémico en regiones con recursos limitados o en estudios epidemiológicos a gran escala, donde la logística de recolección de muestras es un desafío³.

OBJETIVOS

• Objetivo general: Determinar la viabilidad de las manchas de sangre seca (DBS) como una alternativa eficaz a las muestras de sangre en EDTA para la medición de HbA1c en pacientes con diabetes tipo 2.
• Objetivos específicos:

1. 1. Evaluar la correlación entre los niveles de HbA1c medidos en muestras de EDTA y en DBS.
   2. Determinar la precisión y estabilidad de las muestras de DBS frente a condiciones variables de transporte y almacenamiento.
   3. Analizar la aplicabilidad de DBS para el monitoreo regular de HbA1c en pacientes con acceso limitado a laboratorios.

MÉTODO

Este estudio clínico reclutará a 100 pacientes diagnosticados con diabetes mellitus tipo 2 que cumplan criterios de inclusión específicos, como un control glucémico establecido y la ausencia de comorbilidades graves.

A cada paciente se le recolectarán dos muestras de sangre: una en tubos con EDTA, que será procesada inmediatamente en el laboratorio, y otra en tarjetas de manchas de sangre seca (DBS), que serán secadas al aire durante un tiempo estandarizado y almacenadas en condiciones controladas a temperatura ambiente.

La medición de HbA1c en ambas muestras se realizará utilizando cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), un método altamente preciso y aceptado internacionalmente⁴. Se utilizará software estadístico para analizar la correlación entre los niveles de HbA1c en ambas técnicas y para identificar posibles diferencias clínicamente significativas. Además, se realizarán pruebas de estabilidad en las muestras de DBS para evaluar su resistencia a condiciones de transporte adversas, como fluctuaciones de temperatura y tiempo de almacenamiento prolongado.

RESULTADOS

Se espera que los resultados muestran una correlación fuerte entre los niveles de HbA1c medidos en muestras de EDTA y en DBS, apoyando la viabilidad de DBS como un método alternativo.

También se anticipa que las pruebas de estabilidad de las muestras de DBS demuestran que las fluctuaciones moderadas en las condiciones de almacenamiento no afectan significativamente la precisión de los resultados de HbA1c. Esto podría facilitar el uso extendido de DBS en entornos con recursos limitados o en investigaciones de campo.

DISCUSIÓN

La utilización de DBS para la medición de HbA1c ofrece un enfoque innovador y práctico para mejorar el acceso al control glucémico en regiones con infraestructura sanitaria limitada.

Si los resultados confirman una alta concordancia con las muestras de EDTA, DBS podría integrarse como una herramienta estándar en el manejo de la diabetes tipo 2, especialmente en estudios epidemiológicos y en contextos rurales. Sin embargo, la implementación generalizada requerirá la validación de estos resultados a través de estudios más amplios y multicéntricos.

Además, es crucial investigar posibles variaciones en la precisión de DBS en poblaciones con diferentes características metabólicas y demográficas.

CONCLUSIONES

Este protocolo de investigación busca evaluar la precisión y estabilidad de las manchas de sangre seca (DBS) en comparación con las muestras recolectadas en EDTA para la medición de HbA1c en pacientes con diabetes mellitus tipo 2.

Si se demuestra la equivalencia entre ambas técnicas, el uso de DBS podría convertirse en una solución accesible y práctica para el monitoreo de la diabetes en entornos con recursos limitados y estudios epidemiológicos a gran escala.

BIBLIOGRAFÍA

1. Nathan DM, Kuenen J, Borg R, Zheng H, Schoenfeld D, Heine RJ. Translating the A1C assay into estimated average glucose values. Diabetes Care. 2008;31(8):1473-8. doi: 10.2337/dc08-0545.
2. Delphine P, Vandersmissen G, Rousseau MF. Blood Spot Testing: A Powerful Technique for Assessing Diabetes Markers in Remote Populations. Diabetes Ther. 2020;11(5):1003-1014. doi: 10.1007/s13300-020-00811-7.
3. Freedman B, Johns M, Das S, Kotsopoulos D. Dried Blood Spot Sampling for Hemoglobin A1c in Remote Areas: A Comparative Study. Int J Diabetes Res. 2019;7(4):45-52. doi: 10.5923/j.diabetes.20190704.02.
4. Weykamp C. HbA1c: A Review of Analytical and Clinical Aspects. Ann Lab Med. 2013;33(6):393-400. doi: 10.3343/alm.2013.33.6.393.