- María Teresa Pérez Fraigedo. Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico. Aragón, España.
- Miriam Traid Pérez. Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico. Aragón, España.
- Cristina Fabra García. Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico. Aragón, España.
- Cristina Foncillas Sousa. Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico. Aragón, España.
- Patricia Gutiérrez Cortés. Técnico Superior de Laboratorio Clínico y Biomédico. Aragón, España.
- Judith García Henríquez. Técnico Superior de Anatomía Patológica y Citodiagnóstico. Aragón, España.
RESUMEN
Las transfusiones sanguíneas constituyen una práctica esencial en la medicina moderna, pero conllevan el riesgo de reacciones hemolíticas inmediatas y tardías si no se garantiza la compatibilidad donante-receptor. La prueba cruzada (crossmatch) representa la herramienta clave para verificar dicha compatibilidad, complementando la tipificación ABO y Rh y la detección de anticuerpos irregulares. En este trabajo se revisa la evolución histórica, los fundamentos inmunológicos y las técnicas empleadas en las pruebas cruzadas, así como su relevancia clínica y los avances recientes en automatización y genotipificación.
PALABRAS CLAVE
Transfusión sanguínea, prueba cruzada, compatibilidad.
ABSTRACT
Blood transfusions constitute an essential practice in modern medicine, but they carry the risk of immediate and delayed hemolytic reactions if donor–recipient compatibility is not ensured. The crossmatch test represents the key tool to verify such compatibility, complementing ABO and Rh typing and the detection of irregular antibodies. This paper reviews the historical evolution, immunological foundations, and techniques employed in crossmatching, as well as its clinical relevance and recent advances in automation and genotyping.
KEY WORDS
Blood transfusion, crossmatch, compatibility.
DESARROLLO DEL TEMA
Las transfusiones sanguíneas han sido, desde el siglo XX, una de las intervenciones médicas con mayor impacto en la supervivencia y la calidad de vida de millones de pacientes. No obstante, la administración de sangre sin pruebas de compatibilidad puede desencadenar reacciones hemolíticas agudas, con una elevada tasa de mortalidad.
El descubrimiento del sistema ABO por Karl Landsteiner en 1900 y del factor Rh en 1940 marcó un antes y un después en la seguridad transfusional. Desde entonces, la prueba cruzada ha constituido un procedimiento indispensable para confirmar la compatibilidad entre donante y receptor, minimizando el riesgo de reacciones adversas.
Este artículo revisa los aspectos históricos, metodológicos y clínicos de las pruebas cruzadas, resaltando su vigencia en la práctica médica actual y explorando las perspectivas futuras de la medicina transfusional.
Las pruebas cruzadas y la búsqueda de anticuerpos son herramientas fundamentales en inmunohematología, diseñadas para detectar y estudiar antígenos y anticuerpos en el laboratorio. Su objetivo primordial es prevenir la transfusión de sangre incompatible, garantizando la máxima seguridad y beneficio para el paciente.
MATERIAL E INSTRUMENTACIÓN:
- Tarjetas Liss/Coombs para la prueba de Coombs indirecto.
- NaCl/test Enzimática para el test para la prueba salina o enzimática.
- ID- Diluyente 2: (solución de LISS) para la suspensión de los hematíes.
- ID- Papaína: contiene Papaína. Aditivo para la técnica enzimática en 1 tiempo.
- Pipetas de 5, 10, 25 y 50 µl.
- Tubos.
- Centrífuga.
- Muestra a) Del paciente: suero o plasma b) Del donante: sangre del segmento de la bolsa1.
Este proceso consiste en investigar en el suero del receptor los posibles Ac frente a Ag tanto AB0 como el resto de Ag eritrocitarios de una unidad de CH. Para ello, se emplean tarjetas de microtubos o pocillos, se observa la aglutinación eritrocitaria en la mezcla in vitro de suero paciente y hematíes del donante. La mezcla se estudia en diferentes medios fisicoquímicos (incluida la fase antiglobulina) que, modificando las propiedades de suero y hematíes, favorecen la presencia de aglutinación. Cuando no hay aglutinación en ninguno de los medios estudiados, la PCM es negativa para esa unidad específica, hay compatibilidad entre receptor y donante y la unidad se puede administrar3.
PASOS A SEGUIR
Identificar previamente el grupo sanguíneo del donante y del receptor.
– Diluir 1 gota de sangre del donante con 0,5 Ul de solución de baja concentración iónica, para aumentar la valoración de Ac. asociados y así mejorar la reacción Ag – Ac.
– Identificar con los datos del paciente las tarjetas Coombs y salina (son tarjetas de microtubos con una solución preparada).
– Añadimos 50 Ul de la dilución + 25 Ul de plasma o suero del receptor en un pocillo de la tarjeta de Coombs y en la tarjeta salina.
– La tarjeta de Coombs se incuba a 37 ºC y la tarjeta salina a Tª ambiente durante 15 min.
– Centrifugar ambas tarjetas durante 10 min.
– Interpretarlas. Si el tapón de hematíes se encuentra en el fondo del pocillo, se dice que las pruebas cruzadas son negativas por lo que no habría ningún problema en la transfusión, ya que la sangre del donante es compatible con el suero del receptor. Si no se encuentra el tapón de hematíes, las pruebas cruzadas son positivas y habrá que montar un panel para averiguar el AC irregular.
INTERPRETACIÓN:
Las pruebas cruzadas son negativas cuando la totalidad de los hematíes quedan en el fondo del pocillo de la tarjeta.
Si las pruebas son positivas hay que realizar pruebas de compatibilidad con nuevas unidades, investigar la existencia de anticuerpos eritrocitarios irregulares en el suero del paciente y la identificación de los anticuerpos. También da positiva cuando el concentrado de hematíes tiene el Coombs directo positivo2 .
OBSERVACIONES Y SUGERENCIAS:
Es importante que la muestra de suero o plasma esté bien centrifugada, pues puede dar lugar a la aparición de falsos positivos.
CONCLUSIÓN
Las pruebas cruzadas representan un pilar fundamental en la seguridad transfusional. Aunque los avances tecnológicos han simplificado y automatizado muchos procesos, el crossmatch sigue siendo la última línea de defensa para evitar reacciones transfusionales graves. La combinación de métodos serológicos tradicionales con técnicas moleculares y plataformas electrónicas augura un futuro de mayor seguridad, rapidez y personalización en la medicina transfusional.
Aunque a primera vista pareciera que se trata de un tema muy conocido para quien realiza las pruebas, es importante que se tomen en cuenta los pasos y procedimientos por realizar, con énfasis en el control de calidad. En las pruebas cruzadas incompatibles es crucial el cuidado en todo el estudio del paciente.
BIBLIOGRAFÍA
- IT-75-HEM-2D Prueba Cruzada IT-75-HEM-2D PRUEBA CRUZADA [Internet]. Available from: https://www.fundacionsigno.com/bazar/1/IT-75-HEM-2D_Prueba_Cruzada.pdf
- Bonilla-Zavala R. edigraphic.com Importancia de las pruebas cruzadas y de la búsqueda de anticuerpos. Rev Med Inst Mex Seguro Soc [Internet]. 2006;44(2):43–6. Available from: https://www.medigraphic.com/pdfs/imss/im-2006/ims062j.pdf
- Capítulo. PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES: COMPATIBILIDAD EN TRANSFUSIÓN [Internet]. Available from: https://www.sehh.es/archivos/informacion_fehh_fondo_capitulo04.pdf