Aplicación del MALDI-TOF en la identificación rápida de levaduras en muestras clínicas: experiencia en un laboratorio hospitalario

AUTORES

1. Marta Iglesias Belles. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Hospital Nuestra Señora de Gracia, Zaragoza. España.
2. Aroa Calvo Sanjuan. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Facultad de Veterinaria de Zaragoza, Zaragoza. España.
3. Marta Fernández Marín. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Hospital Nuestra Señora de Gracia, Zaragoza. España.
4. Olaia Grijalbo Barcenilla. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Facultad de Veterinaria de Zaragoza, Zaragoza. España.
5. Valvanera Uterga Rodríguez. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Clínica Veterinaria Albeitar, Zaragoza. España.
6. Joan Marín Egea. Técnico Superior en Laboratorio de Diagnóstico Clínico. Facultad de Veterinaria de Zaragoza, Zaragoza. España.

RESUMEN

Las infecciones fúngicas por levaduras suponen un reto creciente en pacientes vulnerables (UCI, inmunodeprimidos, portadores de dispositivos). Los métodos clásicos (cultivo y pruebas bioquímicas) pueden requerir 24–72 h y fallar en especies raras o crípticas. La espectrometría de masas MALDI‑TOF ha transformado la microbiología clínica al permitir la identificación precisa en minutos a partir de colonias y, en ciertos escenarios, directamente desde hemocultivos positivos. Esta revisión sintetiza la contribución de MALDI‑TOF al diagnóstico micológico de levaduras en el entorno hospitalario, comparándolo con métodos convencionales y destacando su impacto en tiempo de respuesta, concordancia con técnicas de referencia y coste‑efectividad. Se discuten limitaciones (dependencia de bases de datos actualizadas, rendimiento menor en especies infrecuentes y en identificación directa) y líneas de mejora (ampliación de librerías, estandarización del pretratamiento de levaduras encapsuladas, integración con algoritmos de decisión). El papel del técnico de laboratorio es clave en la estandarización del flujo de trabajo, control de calidad y validación de resultados.

PALABRAS CLAVE

Hongos levaduriformes, cándida, diagnóstico microbiológico, espectrometría de masas por desorción/ionización láser asistida por matriz (MALDI‑TOF), espectrometría de masas.

ABSTRACT

Yeast infections pose an increasing challenge among vulnerable patients. Conventional methods (culture, biochemical testing) may take 24–72 h and struggle with uncommon species. MALDI‑TOF mass spectrometry enables accurate identification within minutes from colonies and, in selected settings, directly from positive blood cultures. This narrative review summarizes MALDI‑TOF performance in clinical mycology, compared with conventional methods, focusing on turnaround time, agreement with reference techniques, and cost‑effectiveness. Limitations (database coverage, performance in rare species and direct ID) and improvements (library expansion, standardized pretreatments, clinical decision integration) are discussed. The laboratory technician plays a central role in standardized workflows, quality control and result validation.

KEY WORDS

Candida, diagnosis, microbiological, mass spectrometry, spectrometry, mass, matrix‑assisted laser desorption‑ionization, yeasts.

INTRODUCCIÓN

Las candidiasis (mucocutáneas e invasivas) y otras levaduras oportunistas representan una causa relevante de morbilidad y mortalidad hospitalaria, especialmente en UCI y pacientes inmunodeprimidos. Aunque Candida albicans sigue siendo predominante, las especies no‑albicans (C. glabrata, C. parapsilosis, C. krusei, C. tropicalis) han aumentado su participación, con perfiles de susceptibilidad antifúngica distintos^6,9. La identificación rápida a nivel de especie es crítica para seleccionar el antifúngico adecuado y reducir estancias y costes, pero los métodos clásicos son lentos y con rendimiento desigual en especies raras, mientras que las técnicas moleculares, si bien precisas, no siempre están disponibles como rutina. En este contexto, MALDI‑TOF ha demostrado precisión, rapidez y reducción de costes operativos frente a la bioquímica convencional^1,2,3,5.

MALDI‑TOF ha transformado la identificación de levaduras acortando drásticamente el tiempo de respuesta frente a métodos fenotípicos, su rendimiento depende de la calidad de la base de datos y de una preparación estandarizada de la muestra.

La identificación rápida impacta el manejo clínico (adecuación antifúngica y control de infecciones), especialmente en candidemias y brotes.

OBJETIVO

Describir la aplicación de MALDI‑TOF para la identificación rápida de levaduras en muestras clínicas, comparando su rendimiento con métodos convencionales y resaltando su impacto en el flujo de trabajo y en la toma de decisiones clínicas.

METODOLOGÍA

Revisión narrativa (2013–2024) en PubMed, SciELO y bases de guías clínicas, seleccionando estudios que evaluaran: (i) concordancia de MALDI‑TOF con métodos de referencia, (ii) tiempo de respuesta, (iii) identificación directa en hemocultivos positivos, (iv) limitaciones técnicas y dependencia de librerías. Se priorizaron comparativas con bioquímica y/o métodos moleculares y experiencias de implementación hospitalaria^1,5,7,9.

En total se identificaron 9 artículos relevantes, todos incluidos en la síntesis final. De ellos, 6 corresponden a revisiones narrativas o estudios de desempeño de MALDI-TOF en micología clínica, y 3 a estudios multicéntricos comparativos con métodos convencionales.

No se realizó metaanálisis debido a la heterogeneidad de diseños y resultados.

Estrategia narrativa centrada en aplicaciones clínicas en micología (levaduras) y aspectos operativos (preparación, calibración, bibliotecas) con especial atención a especies emergentes y límites de discriminación.

RESULTADOS

Rendimiento diagnóstico. La concordancia de MALDI‑TOF para levaduras suele superar el 95 % respecto a métodos de referencia, con mejoras notables frente a galerías bioquímicas en especies no‑albicans y complejos crípticos^1,3,5. La identificación se obtiene en minutos a partir de colonias, y varios estudios muestran factibilidad en hemocultivos positivos tras un pretratamiento estandarizado, reduciendo tiempos totales frente a flujos clásicos^2,4.

Flujo de trabajo y coste. Tras la inversión inicial, el coste por identificación se reduce de forma significativa frente a galerías, y la capacidad de alto rendimiento permite procesar múltiples aislamientos en paralelo. La rapidez se traduce en decisiones terapéuticas más tempranas y potencial impacto clínico (de escalado/ajuste de antifúngicos), además de ahorro por menor estancia y uso racional de recursos^2,5.

Limitaciones. El rendimiento depende de la calidad y cobertura de la librería, especies raras o emergentes pueden identificarse sólo a nivel de género o no identificarse. Algunas levaduras capsuladas o con pared celular particular requieren pretratamientos (p. ej., extracción con ácido fórmico/acetonitrilo) para mejorar la espectra, y la identificación directa sin cultivo previo muestra sensibilidad variable según la carga fúngica y el protocolo aplicado^1,3,5.

Rol del técnico de laboratorio. La estandarización del preanalítico (tiempo de incubación, selección de colonias, preparación de la diana), el control de calidad con cepas de referencia y la validación de puntuaciones de identificación (score) son determinantes para la fiabilidad. La documentación de no conformidades y la actualización de la librería mejoran la trazabilidad y el desempeño del sistema^4,5.

CONCLUSIONES

La espectrometría de masas MALDI-TOF ha demostrado ser una herramienta eficaz para la identificación rápida y precisa de microorganismos, reduciendo significativamente el tiempo de respuesta en comparación con los métodos convencionales^1,2. Su implementación mejora la toma de decisiones clínicas, optimiza el uso de antibióticos y contribuye a la seguridad del paciente³.

No obstante, presenta limitaciones relacionadas con la dependencia de librerías, la capacidad de discriminar especies emergentes y la necesidad de procedimientos estandarizados de preparación y calibración^2,4. Estos aspectos deben considerarse para garantizar la fiabilidad de los resultados.

El papel del técnico superior en laboratorio clínico (TSLC) es esencial en el manejo de MALDI-TOF: preparación adecuada de las muestras, control de calidad interno y actualización de librerías^5,6. En conclusión, la incorporación de esta tecnología en los laboratorios clínicos constituye un avance significativo que, acompañado de validación local y protocolos claros, asegura resultados fiables y un impacto positivo en la práctica hospitalaria.

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ANEXO

Tabla 1. Recomendaciones operativas de MALDI‑TOF en levaduras.

Nota: Elaboración propia